1实验部分1. 1色素的萃取在水中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液在己烷、庚烷或苯中加反渗透设备入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得橙黄色素溶液以氯仿萃取上述除去橙黄色素的沉淀,可得紫红色溶液在乙醇或丙酮中加入粉末样品,超声波振荡,离心沉淀后得紫红色素溶液。本实验对红曲米样品用正己烷及氯仿反复萃取至无色后,再用无水乙醇萃取得红色素,可知红曲米色素中还含有水溶性色素。
1. 2液超滤水设备相色谱分析1. 2. 1材料与设备红曲(福建古田) 高效液相色谱仪( Waters公司) , XS色谱数据工作站(杭星电脑有限公司) 试剂均为分析纯。
化学世界1. 2. 2样品处理红曲米经粉碎后,用不同溶剂萃取,萃取液均用0. 45 Lm的膜过滤后,再进行HPLC分析。
1. 2. 3实验条件80甲醇水溶液。
2分析结果2. 1两种色谱柱分析结果的比较由于红曲色素各脂溶性组分分子结构的差别,在C18和Phenyl柱上的选择性有所不同,见图1和柱对共轭双键有差别的物质分离较好,但如仅取代基不同时,分离不很好,图2中后面可看到四个较大的峰,收集的前两个馏分( 1, 2)为紫红色,后两个( 3, 4和5, 6)为黄色,其中前两个峰在柱上分离仍为两个峰,而后两个峰在C18柱上分离为后面的四个峰。由于柱对基不同的异构体分离度较好,因此Phenyl柱(图2)上的后两个峰应各是两种异构体,根据其颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性,可判断3号峰为红曲素、4号峰为黄红曲素、5号峰为红斑红曲素和6号峰为红曲玉红素,而前两个峰( 1, 2)为红斑红曲胺和红曲玉红胺。
2. 2溶剂和色素成分色谱图中前10 min所出峰对应于红曲米的水溶性色素成分,这可以从水萃取物的分析得到证实,见图3.这一点与色谱的选择性一致,而非水溶性色素成分均在10 min之后出峰,图4是苯萃取物的色谱图,庚烷和石油醚与苯类同。庚烷、石油醚和苯均只能萃取出后两组黄色素( 4种) ,余下的主要非水溶性色素成分为色谱峰1和2,从颜色、分子结构中共轭情况、相对分子质量和色谱选择性来看, 1号峰是红斑红曲胺, 2号峰为红曲玉红胺。
甘纯玑,陈健,叶友辉。中国粮油学报, 1990, 5( 1) :化学世界
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